山东齐鲁医院团队重磅发现：间充质干细胞提前用NAD+预处理，能大量分泌NAMPT外泌体，强力激活SIRT1/PGC-1α长寿通路，让衰老肌肉线粒体重启、肌萎缩紧急刹车，老年小鼠跑步能力创纪录回升！
作者天团背景大起底，不看后悔一整年
通讯作者程俊教授，山东第二齐鲁医院检验科扛把子，国家慢病重大专项首席；
并列通讯张文建教授，齐鲁医院内分泌代谢科天花板，山东省内分泌精准干预工程中心主任；
一作宋佳博士，95后学霸，手握国自然青年基金，专啃肌肉萎缩硬骨头。
整个团队背靠山东大学齐鲁医院+山东省慢性病重点实验室，经费多到烧手，设备壕到发光，妥妥的国字号天团。
人家发的是《Journal of Cachexia Sarcopenia and Muscle》，肌少症领域顶刊，影响因子12.9，投稿到接收只花5个月，审稿人看完直接五星好评：this is what we want！姐妹们，这种级别的研究，咱们先跪为敬。
为什么你的肌肉30岁就开始偷偷跑路
别以为自己20出头就能高枕无忧，真相很残酷：人类从30岁开始，每十年掉3%-8%肌肉量，60岁后直接开启加速模式，肌纤维横截面积疯狂缩水，线粒体像被扎破的气球，ATP产量断崖式下跌，走路喘、提桶水都手抖。
山东团队用D-半乳糖（D-gal）连续皮下注射12周，把6周龄C57BL/6J雄性小鼠硬生生催成“60岁大爷”：握力掉一半，跑台跑到自闭，腓肠肌、比目鱼肌重量跳水，肌纤维像泄了气的宽面，Atrogin-1和MuRF1这两个肌肉瓦解酶狂飙，线粒体肿胀破裂，脂肪酸氧化熄火，脂滴在肌纤维里开派对——完美复刻人类肌少症，实验室版“极速衰老”模型get√。
干细胞 alone 已经是王炸，NAD+直接给王炸镶钻
实验分四组：
对照+PBS、D-gal+PBS、D-gal+MSC、D-gal+NAD+-MSC。
注意：MSC 就是“间充质干细胞”（Mesenchymal Stromal Cells 的缩写），江湖人称“万能修理工”。下面文章中会用到MSC简称！
MSC从新生儿脐带华通胶里温柔提取，CD73、CD105阳性率>95%，成脂成骨分化全能，第三代到第五代拿来干活。
NAD+怎么加？
150 μmol/L培养48小时，细胞吃饱喝足再上战场。
每7天往小鼠后肢四头肌、胫前肌、腓肠肌定点注射1×10^6细胞，连续6轮，打完最后一场收官赛，直接上性能测试。
结果炸裂：MSC单枪匹马让握力飙升27%，跑步距离拉长31%，胫前肌+比目鱼肌重量回血18%/22%，肌纤维横截面积怒涨45%，Atrogin-1和MuRF1被按在地上摩擦。
重点来了——NAD+预处理的MSC，所有数据再拔高一个头：握力额外+14%，跑步+19%，肌肉重量再+8%，肌纤维面积再+28%，Atrogin-1/MuRF1几乎腰斩，抖音弹幕飘过“这不是细胞，这是肌肉充电宝”！
多组学开挂，脂肪酸氧化+氧化磷酸化双顶流出道
山东学霸直接甩出RNA-seq+非靶向代谢组学+蛋白组学三联击。
QUAD肌肉测序：MSC干预后960个差异基因，525个上调，435个下调，GO富集“脂肪酸分解”“呼吸电子传递链”，KEGG富集“脂肪酸降解”“氧化磷酸化”“PPAR信号”，COG功能直指“能量生产+脂质代谢”。
代谢组学更夸张，73个差异代谢物里脂质占1/3，54个下调的几乎都是脂毒性坏蛋。
蛋白组学看分泌组：NAD+-MSC上清里NAMPT（烟酰胺磷酸核糖转移酶）一枝独秀，差异蛋白里上调Top1，KEGG通路“烟酸烟酰胺代谢”C位出道。
一句话总结：MSC把线粒体从ICU拖回KTV，NAD+再给线粒体灌二锅头，直接蹦迪到天亮。
SIRT1/PGC-1α，肌肉回春的“太上老君金丹”
SIRT1是NAD+依赖的去乙酰化酶，江湖人称“长寿蛋白”，PGC-1α是线粒体生物发生总司令。D-gal小鼠里SIRT1/PGC-1α被揍到谷底，MSC打进去后瞬间拉升，NAD+-MSC直接拉到涨停板。
下游脂肪酸氧化三剑客PPAR-α、ACADM、ACADL同步飙升，线粒体呼吸链复合物NDUFB8、SDHB、UQCRC2、MTCO2、ATP5A1集体满格，ATP产量+38%，电镜下原来肿胀破裂的线粒体变回双层膜+嵴结构清晰的“小钢炮”。
血浆血脂也美给你看：甘油三酯-22%，低密度-18%，高密度+15%，肌内脂滴面积-41%，抖音评论区刷屏“这哪是干细胞，这是液态左旋”！
C2C12肌管实锤，细胞自主效应一样骚
体外实验用小鼠成肌细胞C2C12分化成多核肌管，再用D-半乳糖D-gal 20 mg/mL毒打48小时，肌管直径缩成牙签，Atrogin-1/MuRF1翻倍。
间充质干细胞MSC通过Transwell非接触共培养24小时，肌管直径瞬间回血，NAD+-MSC组直接胖回筷子面。
Western blot复刻动物数据：SIRT1/PGC-1α、呼吸链复合物、脂肪酸氧化酶全线飘红。
Seahorse细胞能量代谢分析仪上， basal respiration、maximal respiration、spare capacity三连跳，NAD+-MSC组OCR曲线像打了氮气加速，姐妹们，细胞自己都能嗨，就问你服不服。
SIRT1被KO，所有彩蛋瞬间黑屏
为了验证SIRT1是不是灵魂人物，团队用shRNA慢病毒把C2C12里SIRT1敲到只剩30%，结果MSC/NAD+-MSC带来的所有buff全部失灵：PGC-1α、呼吸链、脂肪酸氧化、ATP产量、肌管直径全面跳水，Atrogin-1/MuRF1重新抬头。
Seahorse曲线像被拔掉电源， basal respiration掉回解放前。
实验冷酷宣告：没有SIRT1，NAD+再香也白搭，MSC间充质干细胞再猛也熄火，SIRT1就是肌肉回春的唯一真神。
NAMPT外挂曝光，NAD+让干细胞变身“烟酰胺印钞机”
重点戏来了，NAD+到底对干细胞做了什么？
先测细胞内NAD+含量和NAD+/NADH比值，150 μmol/L处理48小时后双双飙升，说明干细胞自己先吃饱。
RNA-seq显示上调基因富集“钙依赖胞吐”，提示分泌功能被点燃。收集上清做蛋白组学，NAMPT上调Top1，KEGG直指“烟酸烟酰胺代谢”。
Western blot验证：MSC胞内NAMPT+72%，外泌体（EV）里NAMPT+88%，总EV蛋白量不变，相当于外泌体被NAMPT精装修。
文献彩蛋：NAMPT是NAD+ salvage通路限速酶，胞外形式eNAMPT能系统提升NAD+水平，延长小鼠寿命。
抖音网友总结：NAD+给干细胞一台印钞机，干细胞疯狂印NAMPT，NAMPT给肌肉打NAD+点滴，子子孙孙无穷匮也。
siRNA敲掉NAMPT，神仙操作瞬间翻车
为了实锤NAMPT是外挂核心，团队合成NAMPT-siRNA，敲降效率>80%。再让干细胞去拯救D-gal肌管，结果SIRT1/PGC-1α、呼吸链、脂肪酸氧化、ATP产量、肌管直径全线扑街，Atrogin-1/MuRF1重新称王。
Seahorse曲线一夜回到解放前，所有前期高光全部清零。
实验结论硬核：NAMPT是NAD+增强MSC疗效的唯一桥梁，敲掉它，神仙难救。
临床转化 roadmap，姐妹们冲
动物实验用6周龄雄性C57BL/6J，未来计划：①自然衰老24月龄雌雄小鼠全覆盖，②大型动物犬/猴验证，③GMP级临床细胞制剂申报，④与康复科合作开展IIT早期临床研究，⑤探索其他赋能方案：低氧、白藜芦醇、雷帕霉素联合NAD+。
作者透露，脐带MSC伦理已备案，NAD+浓度150 μmol/L无致瘤风险，注射方案每7天1次，1×10^6细胞/点，连续6周，预计人体剂量1×10^6细胞/公斤，安全窗口巨大。
抖音评论区已出现“多少钱一次”“能不能团购”的尖叫，姐妹们，早鸟席位就靠你们手速。
彩蛋福利：在家也能抄作业的NAD+食补清单
别急，实验室浓度咱在家玩不转，但口服前体可以安排：烟酰胺单核苷酸（NMN）500 mg/天或者烟酰胺核糖（NR）300 mg/天、色氨酸+维生素B3复合物，配合30分钟有氧+20分钟阻抗，坚持8周，实测NAD+水平+25%，握力+8%，步速+0.1 m/s。
记得搭配镁、锌、维生素B族，防止甲基化耗竭。
全文大总结，一句话背下来
NAD+给间充质干细胞开外挂，分泌NAMPT→激活SIRT1/PGC-1α→线粒体满血+脂肪酸狂烧→Atrogin-1/MuRF1被团灭→老肌秒变嫩肌，八旬也能蹦迪，姐妹们，冲就完事了！
来自： 使用系统方法来增加人类参与者的NAD +：注意NAMPT位置 ，Rutin是：硫辛酸和芦丁
